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Resumen
La activación constitutiva en ausencia de ligando del receptor FLT3 (FMS-like tyrosine kinasa 3) se presenta con alta frecuencia en leucemia mieloide aguda (LMA) debido a dos tipos de mutaciones en su gen: duplicaciones internas en tándem (ITD) que afectan la región yuxtamembrana, o mutaciones puntuales que afectan el dominio tirosina quinasa (TKD). La primera se asocia con pronóstico desfavorable, mientras que para la segunda los resultados no son concluyentes.
En este trabajo se comparan dos métodos para la detección de FLT3-ITD: reacción en cadena de la polimerasa seguida de electroforesis en gel de agarosa (PCR+EGA) y reacción en cadena de la polimerasa seguida de análisis de fragmentos (PCR+AF), se evalúa la información adicional brindada por esta última metodología y se correlaciona el estado mutacional del gen FLT3 con múltiples variables.
Se estudiaron 63 pacientes con LMA para la búsqueda de la mutación FLT3-ITD por ambos métodos. Hubo buena concordancia entre las técnicas (k=0,85). Se detectaron dos falsos negativos por PCR+EGA, así como un resultado indeterminado. En base al ensayo cuantitativo, PCR+AF, las relaciones alélicas encontradas fueron de 0,05 a 7,7 (mediana 0,81) y los tamaños ITD variaron entre 16 a 174 (mediana 34) pb. La frecuencia de aparición de la mutación fue de 20,6%, con predominio en pacientes con subtipo FAB M2. No se hallaron diferencias significativas en el recuento de leucocitos, neutrófilos, plaquetas, hemoglobina y blastos en sangre periférica entre pacientes portadores y no portadores de la mutación. La sobrevida global de los pacientes FLT3-ITD+ fue significativamente menor, con un riesgo relativo de muerte a los 6 meses de 1.45.
Por la relevante información extra que brinda el ensayo PCR+AF respecto de la PCR+EGA, la sencillez y el tiempo acotado de su procedimiento, resulta una técnica sólida para definir pronóstico de la enfermedad y redefinir riesgo, y factible de implementar en el laboratorio clínico.
Citas
2. Jaffe ES, Lee Harris N, Stein H et al. Pathology and Genetics of Tumours of Haematopoietic and Lymphoid Tissues. WHO. 2008; p351.
3. Gary Gilliland D, Griffin JD. The roles of FLT3 in hematopoiesis and leukemia. Blood. 2002; 100:1532-1542.
4. Stirewalt DL, Radich JP. The role of FLT3 in haematopoietic malignancies. Nature. 2003; 3:650-663.
5. Hayakawa F et al. Tandem-duplicated Flt3 constitutively activates STAT5 and MAP kinase and introduces autonomous cell growth in IL-3-dependent cell lines. Oncogene. 2000; 19:624-631.
6. Small D. FLT3 Mutations : Biology and Treatment. American Society of Hematology. 2006; 1:178-184.
7. Port M, Böttcher M, Thol F et al. Prognostic significance of FLT3 internal tandem duplication, nucleophosmin 1, and CEBPA gene mutations for acute myeloid leukemia patients with normal karyotype and younger than 60 years : a systematic review and meta-analysis. Ann Hematol. 2014; 93:1279-1286.
8. Mccormick SR et al. FLT3 Mutations at Diagnosis and Relapse in Acute Myeloid Leukemia. Arch Pathol Lab. Med. 2010; 134:1143-1151.
9. Levis M. FLT3 mutations in acute myeloid leukemia : what is the best approach in 2013 ? Am Soc Hematol. 2013; 1:220-226.
10. Cuervo-Sierra J, Jaime-Pérez JC, Gómez-Almaguer D. Mutaciones del módulo FLT3 en leucemia aguda mieloblástica. Rev Hematol. 2012; 13:177-184.
11. Gaich P, Sastre D, Rodriguez C. Prevalencia de Mutaciones FLT3 en Leucemias Mieloblásticas Agudas. Publicaciones científicas Colegio de Bioquímicos de la Provincia de Códoba, www. cobico.com.ar/publicaciones. (2011).
12. Döhner H, Estey E, Grimwade D, Amadori S et al. Diagnosis and management of AML in adults: 2017 ELN recommendations from an international expert panel. Blood. 2017; 129: 424-447.
13. Zhang Q, Bai S, Vance G. Molecular genetic tests for FLT3, NPM1, and CEBPA in acute myeloid leukemia. Methods Mol Biol. 2013; 999:105-121.
14. Noguera NI et al. Simultaneous detection of NPM1 and FLT3-ITD mutations by capillary electrophoresis in acute myeloid leukemia. Leukemia. 2015; 19:1479-1482.
15. Schlenk RF et al. Differential impact of allelic ratio and insertion site in FLT3-ITD–positive AML with respect to allogeneic transplantation. Blood. 2014; 124:3441-3450.
16. Kim Y et al. Quantitative fragment analysis of FLT3 -ITD efficiently identifying poor prognostic group with high mutant allele burden or long ITD length. Blood Cancer J. 2015; 5:, e336-7.
17. Thiede C et al. Analysis of FLT3-activating mutations in 979 patients with acute myelogenous leukemia : association with FAB subtypes and identification of subgroups with poor prognosis. Blood. 2002; 99:4326-4336.
18. Kroschinsky FP et al. Cup-like acute myeloid leukemia: new disease or artificial phenomenon? Hematologica. 2008; 93:283-286.
19. Abel H et al. Detection of FLT3 Internal Tandem Duplication in Targeted, Short-Read-Length, Next-Generation Sequencing Data J Mol. Diagnostics. 2013; 15:80-93.
20. Gulley ML, Shea TC, Fedoriw Y et al. Genetic Tests To Evaluate Prognosis and Predict Therapeutic Response in Acute Myeloid Leukemia. J Mol Diagnostics. 2010; 12:3-16.
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